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柱層析填料主要包括的三種模式及操作的一些建議

更新時間:2021-07-14      點擊次數(shù):1948
   柱層析填料是一種設(shè)計用于在病毒純化的捕獲和中度純化階段使用的層析填料。高載量與高流速和低反壓的結(jié)合降低了工藝周期時間并提高了產(chǎn)量。Capto家族系列由專門設(shè)計用于快速、有效和節(jié)約成本的純化的現(xiàn)代化工藝層析填料組成,符合現(xiàn)代大規(guī)模生物制藥和疫苗生產(chǎn)工藝的迫切需要。
 
  柱層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡單的分離模式方便、簡單,但是洗脫時間長。減壓分離盡管能節(jié)省填料的使用量,但是由于大量的空氣通過填料會使溶劑揮發(fā),并且有時在柱子外面會有水汽凝結(jié),以及有些易分解的化合物也難以得到,而且還必須同時使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動速度,縮短樣品的洗脫時間,是一種比較好的方法,與常壓柱類似,只不過外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣,雙連球或者小氣泵等。
 
  柱層析填料操作的一些建議:
  1、使用前首先明確自己的分離目的,即要做哪一方面的分離,從而選擇合適的凝膠填料,尤其對于沒有成熟工藝的學(xué)生和研發(fā)人員,請大家務(wù)必查閱文獻或者詢問老師,同時根據(jù)自己的分離要求,選擇合適長度和直徑的層析柱;  
 
  2、選擇好層析柱和填料以后,嚴格按照填料的要求來操作,包括填料的溶脹、脫氣、裝柱,期間務(wù)必嚴格按照說明書操作;
 
  3、適當(dāng)控制上樣量,上樣以前務(wù)必要過0.22µm濾膜;
 
  4、選擇合適的流動相,根據(jù)膠的性質(zhì)決定能否用泵加壓;
 
  7、使用完畢后,請將層析柱做好處理,將層析柱堵好,以防干膠或者進氣泡,同時請做好試驗紀錄,以便下一位同學(xué)用時方便查詢使用情況;
 
  8、試驗過程中所有用水或者溶液必須經(jīng)過抽濾和脫氣,嚴防氣泡;
 
  9、若在使用過程中發(fā)生意外情況。